Современный методический уровень изучения структуры и функций мембранных структур позволяет как бы «препарировать» мембрану и при развитии патологических процессов дифференцировать какие уровни липидного бислоя в большей степени подвергаются процессам пероксидации в первую очередь, на каком этапе срабатывает антиперекисная и антиоксидантная защита и на сколько высоки концентрации липоперекисей (КД + СТ) для синтеза лейкотриенов и простагландинов [113].
В связи с этим, в настоящей работе нами проведено изучение процессов пероксидации мембранных липидов эритроцитов дифференцированно в гептановой и изопропанольной фазах, т. е. в насыщенных и ненасыщенных липидах у детей раннего возраста при различных формах бронхитов и при обострении БА.
В табл. 23 представлены результаты исследования содержания липидов и продуктов ПОЛ в мембранах эритроцитов у детей раннего возраста с острым бронхитом. Установлено, что у всех пациентов исследуемой группы в первые дни заболевания увеличено содержание веществ с ИДС, ДК и КД+СТ в гептановой фазе (р<0,05); в тоже время содержание выше перечисленных продуктов ПОЛ в изопропаноле умеренно снижено (р>0,05).
Учитывая, что в изопропаноле наблюдается снижение потенциальных продуктов ПОЛ от референтных показателей (р=0,004), можно сделать вывод о том, что у детей с острым бронхитом, в первую очередь, процессам переокисления мембранных липидов подвергаются полиненасыщенные жирные кислоты. Первичные и вторичные продукты СРО имеют только тенденции к снижению (р=0,766; 0,478 соответственно). Сниженное содержание оснований Шиффа, как продуктов нейтрализации ПОЛ в гептановой фазе (р=0,000) говорит о явных адаптационных нарушениях в первые дни болезни у детей раннего возраста.
Таблица 23.
Содержание продуктов ПОЛ в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта у детей с острым бронхитом
(единицы оптической плотности)
Изучаемые Показатели | Фаза липид- ной экстрак-ции | Группы наблюдения | ||
Контрольная группа (n=25) | Острый бронхит (n =15) | р | ||
- Вещества с изолированными двойными связями (ИДС) -Диеновые конъюгаты (ДК) -Сумма кетодиенов и сопряженных триенов (КД+СТ) -Шиффовы основания (ШО) | Гептан | 0,035±0,012 0,038±0,01 0,05±0,01 0,06±0,008 | 0,411±0,158 0,318±0,075 0,154±0,008 0,015±0,007 | 0,004 0,000 0,000 0,000 |
-Вещества с изолированными двойными связями(ИДС) -Диеновые конъюгаты (ДК) -Сумма кетодиенов и сопряженных триенов (КД+СТ) -Шиффовы основания (ШО) | Изопро панол | 1,75±0,13 0,65±0,13 0,40±0,09 0,16±0,04 | 1,059±0,192 0,59±0,14 0,31±0,06 0,069±0,016 | 0,004 |
Расчеты индексов окисленности липидных компонентов мембран эритроцитов (ИОЛ) позволяют более наглядно рассмотреть последствия оксида-
тивного стресса. В табл. 24 представлены ИОЛ для ДК и (КД+СТ) в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта в исследуемых группах.
Таблица 24
Индексы окисленности липидов (ИОЛ) эритроцитов
у детей с острым бронхитом
Фаза липидной экстракции | Показатель | Группы наблюдения | ||
Контрольная группа n=25 | Острый бронхит n =15 | р | ||
Гептан | ИОЛ ДК ИОЛ КД+СТ | 1,085 ±0,11 1,43±0,29 | 0,77±0,14 0,37±0,16 | 0,011 |
Изопропанол | ИОЛ ДК ИОЛ КД+СТ | 0,37 ±0,11 0,23±0,029 | 0,56±0,08 0,29±0,008 | 0,000 |
Установлено, что в группе пациентов с острым бронхитом ИОЛКД+СТ в изопропанольной фазе увеличивается, а гептане снижается (р=0,000; 0,011 соответственно). Это полностью согласуется с закономерностями высокой патологической активности процессов ПОЛ в мембранах эритроцитов у детей с острым бронхитом, в первую очередь, в ненасыщенных и полиненасыщенных липидах, поскольку доля первичных и вторичных продуктов ПОЛ в изопропаноле растет по отношению к окислительному потенциалу (ИДС).
Возможно, в острый период заболевания у детей раннего возраста, вследствие снижения эффективности окислительного фосфорилирования включаются компенсаторные механизмы, приводящие к увеличению кислородных радикалов, что стимулирует процессы ПОЛ [7]. В большей степени этому процессу подвержены ненасыщенные жирные кислоты и в эритроцитах пациентов исследуемой группы возрастает доля насыщенных жирных кислот, а разрушаются и удаляются преимущественно ненасыщенные липидные компоненты.
Более детально относительное содержание ненасыщенных жирнокислотных остатков, подвергающихся пероксидации и удалению из мембранных комплексов эритроцитов, отражает показатель степени ненасыщенности остатков жирных кислот (СННожк) для ИДС, ДК и (КД+СТ).
Данные исследования приведены в табл.25.
Таблица 25
Степень ненасыщенности остатков жирных кислот липидных компонентов эритроцитов у детей раннего возраста с острым бронхитом
Показатели | Группы наблюдения | ||
Контрольная группа n=25 | Острый бронхит n =15 | р | |
СННожк 220 СННожк 232 СННожк 278 | 50,0±19,58 17,1±2,05 8,0±0,5 | 2,6±0,68 1,8±0,001 2,01±2,73 | 0,000 0,010 |
При остром бронхите отмечается снижение показателей СННожк для перечисленных потенциальных, первичных и вторичных продуктов СРО со статистически значимыми различиями.
Активность процессов ПОЛ в значительной степени определяется состоянием антиоксидантной и антиперекисной защиты клеточных структур мембран эритроцитов. Для оценки данной системы у наблюдаемых детей проведено определение активности ведущих ферментов антиоксидантной и антиперекисной защиты – СОД и каталазы. Результаты представлены в табл. 26.
По данным таблицы следует, что у детей с острым бронхитом в начале заболевания СОД практически не меняются, на фоне резкого снижения активности каталазы (р=0,012) в сравнении с группой здоровых детей.
Таблица 26.
Показатели активности антиоксидантной и антиперекисной системы мембран эритроцитов у больных с острым бронхитом
Изучаемые показатели | Группы наблюдения | ||
Контрольная группа n=25 | Острый бронхит n =15 | р | |
СОД % торможения | 40,2±3,26 | 41,1±0,59 | |
Каталаза млмоль/мл. мин. | 2,15±0,13 | 1,59±0,17 | 0,012 |
По данным таблицы следует, что у детей с острым бронхитом в начале заболевания активность СОД практически не меняется, на фоне резкого снижения активности каталазы (р=0,012) в сравнении с группой здоровых детей.
Анализируя полученные данные можно сделать вывод, что как антиоксидантная, так и антиперекисная защита мембран эритроцитов у детей раннего возраста с острым бронхитом недостаточна, что и определяет интенсивность перекисного окисления в большей степени ненасыщенных жирнокислотных компонентов.
Высокая активность ПОЛ на фоне сниженной активности антиперекисной защиты не может не повлиять на содержание фосфолипидов мембран эритроцитов. Результаты данных исследований представлены в табл. 27.
Таблица 27
Процентное соотношение отдельных фракций липидов в мембранах эритроцитов у больных с острым бронхитом
Фосфолипиды, (%) | Контрольная группа n=25 | Острый бронхит n =15 | р |
ФЭА | 26,90±1,09 | 20±3,07 | 0,016 |
ФХ | 35,38±1,47 | 32,3±7,6 | |
СФМ | 19,74±1,18 | 24,61±4,61 | |
ФС | 13,20±0,81 | 18,4±3,06 | 0,050 |
ЛФХ | 4,73±0,05 | 7,69±1,54 | 0,017 |
Так, в мембранах эритроцитов отмечается снижение фракции фосфатидилэтаноламина (р=0,016) у пациентов исследуемой группы, как легко окисляемых фосфолипидов. Одновременно определяется статистически достоверное повышение фракций фосфатидилсерина и лизофосфатидилхолина (р=0,05; 0,017). Повышенное содержание фракции ЛФХ в мембранах эритроцитов у больных свидетельствует о выраженных мембранопатологических процессах уже в первые дни острого инфекционного заболевания.
Таким образом, у детей с острым бронхитом при изучении иммунологических маркеров клеточного взаимодействия определяется разнонаправленное изменение изучаемых цитокинов, что говорит об иммунологической
незрелости иммунного ответа у детей раннего возраста, в частности о недостаточной стимуляции и дифференцировки В−лимфоцитов в антителпродуцирующие плазматические клетки и подавление активности Th1 иммунного ответа [73,122, 130].
Показатели вегетативной иннервации бронхиального дерева у детей раннего возраста с острым бронхитом меняются незначительно и характеризуют умеренные адаптационно − трофические изменения в начале заболевания.
На уровне фосфолипидной структуры мембранного комплекса у детей в данной группе в эритроцитах происходят изменения, характеризующие включение адаптационно − компенсаторного механизма.
Процессам ПОЛ более активно подвержены ненасыщенные жирные кислоты и в мембранах эритроцитов пациентов исследуемой группы, о чем свидетельствует нарастание доли насыщенных жирных кислот.
Антиоксидантные и антиперекисные системы защиты у детей раннего возраста даже при простом бронхите недостаточна, в связи, с чем и происходит активное разрушение в мембранах эритроцитов ненасыщенных жирных кислот.
Полученные данные необходимо учитывать при проведении патогенетической терапии и в процессе реабилитации детей, перенесших острый бронхит в раннем возрасте.
2.3.2 Характеристика некоторых показателей иммунного статуса, вегетативного баланса и процессов дестабилизации клеточных мембран эритроцитов при обструктивном бронхите (1-2 эпизода бронхообструкции) у детей раннего возраста.
Для изучения иммунопатологических и мембраностабилизирующих процессов при инфекционном обструктивном бронхите у детей первых 3-х лет жизни мы провели клиническое, иммунологическое и биохимическое исследование у 24 детей. Отличительной особенностью данной патологии
является наличие у ребенка бронхообструктивного синдрома, характеризующегося отеком слизистой стенки бронхов, гиперпродукцией мокроты и спазмом гладкой мускулатуры бронхов, развивающихся на фоне ОРИ [82.]
При исследовании провоспалительных маркеров у детей с обструктивным бронхитом определяется также разнонаправленная динамика IL2 и IL10, как и при остром бронхите, но у детей с обструктивным бронхитом наблюдается более выраженное снижение уровня IL2, что свидетельствует о значительном подавлении иммунного ответа у детей с ООБ [130]. Данные представлены в табл. 28.
Таблица 28.
Показатели цитокинов при остром обструктивном бронхите без аллергической предрасположенности у детей раннего возраста M ± SD
Показа- тели Рg\мл | Группы наблюдения | ||
Контрольная группа n=25 | Обструктивный бронхит (1-2 эпизода бронхообструкции) n =24 | р | |
IL 2 | 12,35+0,46 | 5,23 ± 0,63 | 0,000 |
IL 10 | 1,12+0,03 | 40,61± 2,54 | 0,000 |
При обструктивном бронхите у детей раннего возраста определяется высокая активность β – АРМ эритроцитов, что говорит о десенситизации β- адренорецепторов, в том числе и в бронхиальном дереве.
Уровень активности холинэстеразы увеличивается в сравнении с нормативными показателями. Полученные данные характеризуют состояние вегетативной дисфункции организма ребенка при обструктивном бронхите [34]. Данные представлены в табл. 29.
Таблица 29
Показатели β-адренергической реактивности мембран
эритроцитов и активности сывороточной холинэстеразы
у больных с острым обструктивным бронхитом (1-2 эпизода бронхообструкции)
Показатели | Контрольная группа n =25 | Острый обструктивный бронхит (1-2 эпизода бронхообструкции) n =24 | p |
β –АРМ (усл. ед) M ± SD | 18,0±2,0 | 42,1 ± 11,73 | 0,044 |
ХЭ*(Е/л) M ± SD | 3576,25±255,0 | 6088,11 ± 716,6 4 | 0,002 |
При изучении процессов ПОЛ мембран эритроцитов при обструктивном бронхите установлена более высокая активность, чем при остром бронхите. Результаты исследований представлены в табл. 30.
Установлено, что в первые дни заболевания нарастает уровень ИДС (р=0,006) в насыщенных жирных кислотах (гептановая фаза липидной экстракции), и повышение, хотя и незначительное, уровня ДК и КД +СТ (р>0,05), свидетельствует о вовлечении в процессы переокисления не только липидов с ненасыщенными, но и насыщенными жирными кислотами мембран эритроцитов.
В тоже время процессы нейтрализации токсических продуктов ПОЛ при обструктивном бронхите страдают, так как определяется достоверно низкий уровень ШО (р=0,000) в сравнении с группой здоровых детей.
В ненасыщенных жирных кислотах уровень продуктов переоксидации меняется незначительно, поэтому говорить об активности процессов ПОЛ в ненасыщенных липидах возможно только по показателю индекса окисленности (ИОЛ).
Таблица 30
Содержание продуктов ПОЛ в гептановой и изопропанольной фазах
липидного экстракта у детей с острым обструктивным бронхитом(1-2 эпизода бронхообструкции) (единицы оптической плотности)
Изучаемые показатели | Фаза липидной экстракции | Группы наблюдения | ||
Контрольная группа n=25 | Обструктивный бронхит n =24 | р | ||
-Вещества с изолированными двойными связями (ИДС) -Диеновые конъюгаты (ДК) -Сумма кетодиенов и сопряженных триенов(КД+СТ) -Шиффовы основания(ШО) | Гептан | 0,035±0,012 0,038±0,01 0,05±0,01 0,06±0,008 | 0,44±0,143 0,22±0,130 0,089±0,032 0,018±0,008 | 0,006 0,000 |
-Вещества с изолированными двойными связями(ИДС) - Диеновые конъюгаты (ДК) -Сумма кетодиенов и сопряженных триенов(КД+СТ) -Шиффовы основания(ШО) | Изопро-панол | 1,75±0,13 0,65±0,13 0,40±0,09 0,16±0,04 | 1,31±0,51 0,73±0,31 0,44±0,22 0,19±0,18 |
Индексы окисленности для ДК и КД+СТ по отношению к исходному уровню ненасыщенности липидов (ИДС) при обструктивном бронхите значительно снижаются в гептановой фазе липидного экстракта и повышаются в изопропаноле (табл.31). Это так же подтверждает интенсивность процессов пероксидации, протекающей в ненасыщенных жирных кислотах. Именно ненасыщенные жиры в большей степени подвержены разрушению и удалению из мембраны Эц при обструктивном синдроме в сравнении с острым бронхитом.
Таблица 31
Индексы окисленности липидов (ИОЛ) эритроцитов
у детей с острым обструктивным бронхитом
(1-2 эпизода бронхообструкции)
Фаза липидной экстракции | Показатель | Группы наблюдения | ||
Контрольная группа n=25 | Обструктивный бронхит n =24 | р | ||
Гептан | ИОЛ ДК ИОЛ КД+СТ | 1,085 ±0,11 1,43±0,29 | 0,50±0,24 0,20±0,01 | 0,029 0,000 |
Изопропанол | ИОЛ ДК ИОЛ КД+СТ | 0,37 ±0,01 0,23±0,029 | 0,56±0,022 0,33±0,051 | 0,000 |
Об этом свидетельствуют и резко сниженные показатели степени ненасыщенности остатков жирных кислот липидов мембран эритроцитов для ИДС, ДК (р<0,05) и КД+СТ исследуемой группы пациентов. Результаты исследования представлены в табл.32.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 |
