Клинико-прогностическое значение оценки функционально-метаболической активности лейкоцитов, среднемолекулярных пептидов, системы про-антиоксидантной защиты крови у больных Вич-инфекцией (стр. 1 )

На правах рукописи

САБАНЧИЕВА ЖАНЕТА ХУСЕЙНОВНА

КЛИНИКО-ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОЦЕНКИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕЙКОЦИТОВ, среднемолекулярных пептидов, СИСТЕМЫ ПРО-АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ КРОВИ

У БОЛЬНЫХ ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ

14.00.10-инфекционные болезни

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук

Москва – 2007

Работа выполнена в Кабардино-Балкарском Государственном университете им. Федерального агентства по образованию и науки Российской Федерации

Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор

Нагоев Беслан Сафарбиевич

Официальные оппоненты:

Член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор

заведующий отделением ФГУ "Центральная

клиническая больница при Управлении

делами Президента РФ"

Доктор медицинских наук

ведущий научный сотрудник ФГУН «ЦНИИ

эпидемиологии» Роспотребнадзора

Доктор медицинских наук, профессор

заведующий кафедрой инфекционных болезней

ГОУ ВПО «Российский университет Дружбы

народов» Минобразования РФ

Ведущая организация – ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский

университет» Росздрава.

Защита состоится «____»__________2007 г. в______ часов на заседании диссертационного совета Д 2в ФГУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора ( а).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора.

Автореферат разослан «____»________________2007г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

Актуальность проблемы. Прогноз развития эпидемии ВИЧ-инфекции на сегодняшний день крайне неблагоприятен (, с соавт., 2004; , 2004; , 2006, , с соавт., 2006). По оценкам ВОЗ и ЮНЭЙДС, в годах около 45 млн. людей на планете инфицированы ВИЧ-инфекцией. ВИЧ-инфекция, как в России, так и во всем мире, занимает первое место по уровню психологического стресса (, 2003, , с соавт. 2004; , ). На конец 2006 года общее число зарегистрированных случаев ВИЧ-инфекции в Российской Федерации составило 358918. Однако, по мнению ученых, истинное число ВИЧ-инфицированных примерно в 5 раз больше, чем зарегистрировано ( и соавт., 2003; 2004, 2005; с соавт., 2004, 2006). Почти 90 % вновь выявляемых случаев заражения составляют потребители инъекционных наркотиков ( с соавт., 2000; с соавт., 2005). Распространение вируса у больных наркоманией не только способствует росту заболеваемости ВИЧ-инфекций, но и усугубляет ее течение. В патогенезе ВИЧ-инфекции, наряду с его основными – патогенными свойствами вируса и способностью иммунной системы противостоять ему, принимают участие множество ко-факторов, определяющих развитие тех или иных звеньев патогенеза (, 2001; с соавт., 2001; J. Bidvell, L. Keen et al., 1999). Одними из таких ко-факторов, по-мнению ряда исследователей, являются пути и способы передачи ВИЧ, сочетание вирусных гепатитов и ВИЧ, туберкулеза и ВИЧ (, 2001; с соавт., 2001; , 2003; 2004; с соавт., 2005; с соавт., 2005).

Известно, что основой невосприимчивости к инфекционным агентам являются реакции неспецифической резистентности организма ( с соавт., 1983; , , 1993). Противомикробная защита осуществляется благодаря совокупности влияния, как клеточных, так и гуморальных факторов (M. Baggiolini, 1984; M. Alam, 1987). Фоновое состояние неспецифической резистентности организма во многом определяет развитие и исход любого инфекционного процесса. (, 1987). Нейтрофильные гранулоциты осуществляют первую линию антимикробной защиты, и от их функционального потенциала во многом зависят течение и исход воспалительного процесса (, 1986; с соавт., 1987; , 2004). Нейтрофилы занимают одну из наиболее активных позиций в системе гуморально-клеточной кооперации крови и соединительной ткани. Поэтому эти клетки являются универсальной мишенью и, соответственно, индикатором различных нарушений гомеостаза и гомеокинеза (, 1978; , 1986; Л. М).

В настоящее время не вызывает сомнений, что процессы свободнорадикального окисления (СРО) играют чрезвычайно важную роль в жизнедеятельности клеток, так как протекают в нормально метаболизирующих клетках. При нарушении механизмов регулирования процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) происходит избыточное накопление свободных радикалов, которые вызывают нарушение проницаемости, структуры и функции биомембран, повреждение липидов, белков, нуклеиновых кислот, изменения биоэнергетики, регуляторных и защитных функций, иммунитета (, 2002; , 2002; , , 2003; , 2004).

Синдром эндогенной интоксикации сопутствует многим заболеваниям и патологическим состояниям, определяя их тяжесть течения и прогноз ( с соавт., 1990). Значение определения в биологических жидкостях уровня олигопептидов с молекулярной массой Д, известных как среднемолекулярные пептиды (СМП), при различных заболеваниях общепризнано ( с соавт., 1986; с соавт.,1990; с соавт., 1991; с соавт., 1994; , , 2000; с соавт., 2002; , , 2003; , 2003; , 2004; , 2006). Однако, несмотря на большое внимание к проблеме эндогенной интоксикации при различных патологических состояниях при ВИЧ-инфекции остаются недостаточно изученными.

В связи с этим представляет значительный интерес комплексное изучение сложных патогенетических механизмов неспецифической резистентности организма, выяснение роли и значения показателей СРО, а также антиоксидантной защиты у больных ВИЧ-инфекцией, в зависимости от стадии, глубины патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний, а также предпринята попытка рациональной коррекции выявленных нарушений антиоксидантными препаратами.

Цель работы. Целью работы явилось проведение клинико-лабораторной оценки функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов, состояния среднемолекулярных пептидов и системы про-антиоксидантной защиты крови у больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от стадии и степени тяжести патологического процесса, характера сопутствующих заболеваний, наличия наркомании, ко-инфекции, а также результатов лечебных мероприятий.

Задачи исследования. В динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией:

1)  изучить основные показатели микробицидной системы нейтрофильных лейкоцитов (активность миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз, содержание катионного белка, гликогена и липидов);

2)  выявить состояние фагоцитарно-метаболической функции лейкоцитов с помощью проведения спонтанного НСТ-теста;

3)  установить значение уровня среднемолекулярных пептидов в плазме крови как показателя эндогенной интоксикации, диагностического, прогностического критерия в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний и осложнений;

4)  исследовать содержание перекисного окисления липидов плазмы крови;

5)  выявить закономерность изменений антиоксидантной системы крови в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующих заболеваний;

6)  провести сопоставление между цитохимическими показателями лейкоцитов, среднемолекулярых пептидов, свободнорадикальных систем крови и основными параметрами лабораторного исследования крови (количество лейкоцитов, палочкоядерный сдвиг, СОЭ), а также выявить корреляционную связь с основными показателями иммунной системы (CD4-, CD8-лимфоцитов, CD4/CD8)

7)  установить диагностическую и прогностическую информативность полученных показателей функционально-метаболической активности лейкоцитов, среднемолекулярных пептидов в плазме крови и про-антиоксидантных систем крови;

8)  обосновать и оценить эффективность лечения у больных ВИЧ-инфекцией с применением в комплексной терапии иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного препарата – тамерит.

Работа проводилась в соответствии с комплексным планом НИР Кабардино-Балкарского государственного университета Минобразования РФ по программе «Университеты России», раздел II «Медицина». Тема: «Изучение показателей микробицидной системы лейкоцитов и среднемолекулярных пептидов в плазме крови организма в норме и при инфекционных заболеваниях различной этиологии», зарегистрирована в ВНТИ-центре, государственная регистрация № 01.9., а также по проблеме «Состояние прооксидантной и антиоксидантной системы организма при инфекционных заболеваниях различной этиологии и методы ее коррекции». Номер государственной регистрации во ВНТИ-центре 012

Научная новизна. В результате проведенных исследований впервые при ВИЧ-инфекции установлено закономерное угнетение активности миелопероксидазы лейкоцитов, содержания катионного белка и липидов в цитоплазме нейтрофильных гранулоцитов при одновременном возрастании активности щелочной и кислой фосфатаз, а также уровня гликогена в нейтрофильных лейкоцитах и возрастание показателя НСТ-теста у больных ВИЧ-инфекцией. Впервые у больных ВИЧ-инфекцией выявлено закономерное возрастание средних молекул в плазме крови с максимальным значением в стадию вторичных заболеваний. Обнаружена активация процессов перекисного окисления липидов на фоне истощения антиоксидантной защиты организма у больных ВИЧ-инфекцией. Установлена патогенетическая значимость изменения малонового диальдегида, церулоплазмина, общей антиокислительной активности, супероксиддисмутазы и каталазы эритроцитов у больных ВИЧ-инфекцией. Получена зависимость выраженности сдвигов функционально-метаболической активности нейтрофилов, состояния среднемолекулярных пептидов и про-антиоксидантных систем крови в зависимости от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекций и сопутствующих хронических воспалительных заболеваний, а также от полноты лечебных мероприятий. Впервые апробирована эффективность применения иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного действия препарата тамерита в процессе терапии ВИЧ-инфекции.

Практическая значимость. Цитохимическое определение интралейкоцитарных компонентов и показателя спонтанного НСТ-теста может служить самостоятельным критерием состояния неспецифической резистентности организма, определяющим степень тяжести воспалительного процесса у больных ВИЧ-инфекцией, прогнозирование осложнений и возможного неблагоприятного исхода заболевания. Значительно выраженные изменения уровня среднемолекулярных пептидов в плазме крови, как показателя эндогенной интоксикации свидетельствует о тяжелом течении болезни, возможном присоединении осложнений или возникновении новых очагов воспаления. Впервые проведено комплексное исследование показателей перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты крови больных ВИЧ-инфекцией в зависимости от стадии, глубины патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекции и при обострении сопутствующих заболеваний. Обнаружена активация процессов перекисного окисления липидов на фоне истощения антиоксидантной защиты организма у больных ВИЧ-инфекцией. Впервые установлен и предложен эффективный иммуномодулирующий, противовоспалительный и антиоксидантный препарат тамерит в лечении ВИЧ-инфекции.

Положения, выносимые на защиту:

1.  В динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией наблюдаются закономерные сдвиги основных компонентов вирулоцидной системы лейкоцитов, зависящие от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекций и сопутствующих хронических воспалительных заболеваний, а также от полноты лечения, что имеет дополнительное клинико-диагностическое значение.

2.  Проведение исследований спонтанного НСТ-теста у больных ВИЧ-инфекцией дает информацию о состоянии функционально-метаболической активности лейкоцитов и может служить критерием нарушения фагоцитарной функции, а также для оценки прооксидантной системы организма. У больных с ВИЧ-инфекцией изменения функционально-метаболической активности лейкоцитов носят неспецифический характер, являясь объективным критерием состояния резистентности организма.

3.  Выраженность изменений средних молекул в плазме крови зависит от стадии, наличия наркомании, ко-инфекции и сопутствующей патологии и может быть использован в качестве дополнительного критерия тяжести процесса, прогноза развития тяжелых форм заболевания, присоединения осложнений, а также в качестве критерия эффективности лечения.

4.  В динамике заболевания у больных ВИЧ-инфекцией происходит повышение активности перекисного окисления липидов, зависящие от стадии, степени тяжести патологического процесса, наличия наркомании, ко-инфекций и сопутствующих хронических воспалительных заболеваний.

5.  Изученные показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты организма при ВИЧ-инфекции можно использовать в качестве дополнительного критерия тяжести процесса, прогноза развития осложнений, а также от полноты лечения, что имеет дополнительное клинико-диагностическое значение.

6.  Возможность использования иммуномодулирующего, противовоспалительного и антиоксидантного препарата тамерита у больных ВИЧ-инфекцией в комплексной терапии.

Внедрение в практику.

Материалы диссертационной работы внедрены в практику работы Центра по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями МЗ КБР. Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе кафедр инфекционных болезней, микробиологии, вирусологии и иммунобиологии, дерматовенерологии, факультетской и госпитальной терапии медицинского факультета КБГУ при прохождении тем: «Инфекция и инфекционный процесс», «ВИЧ-инфекция», «Неспецифическая реактивность и иммунитет».

Публикации: По материалам диссертационной работы опубликовано 56 научных работ, в том числе 1 монография, 6 статей в центральных ВАКовских журналах: «Инфекционные болезни», «Эпидемиология и инфекционные болезни» и «Аллергология и иммунология» и 10 работ на конференциях с международным участием.

Апробация диссертационного материала: основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на ежегодных итоговых научных конференциях сотрудников и молодых ученых Кабардино-Балкарского госуниверситета (г. Нальчик, ), на заседаниях Кабардино-Балкарского научного общества инфекционистов (г. Нальчик, 2005, 2006), на Российской научно-практической конференции Узловые вопросы борьбы с инфекцией» (Санкт-Петербург, 2004), на VI Общероссийской научной конференции с международным участием «Гомеостаз и инфекционный процесс» (Кисловодск, 2005), на II и III международных конференциях молодых ученых и специалистов (Турция, 2005; Тунис, 2005), на Российской научной конференции «Диагностика, терапия, профилактика социальнозначимых заболеваний человека» (Иркутск, 2005г.), на VI Общероссийской научной конференции с международным участием «Успехи современного естествознания» (Догомыс, Сочи, 2005), на IV Российской конференции «Проблемы морфологии. Теоретические и клинические аспекты» (Астрахань, 2005), на научной конференции «Современные наукоемкие технологии» (о. Тенерифе, 2005), на III международной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине» (Греция, 2005), на юбилейной конференции «Современные проблемы науки и образования» (Москва, 2005), на Российской научно-практической конференции посвященной 110-летию кафедры инфекционных болезней (Санкт-Петербург, 2006), на Международной научно-практической конференции «Сепсис: проблемы диагностики, терапии и профилактики» (Харьков, 2006), на V-й межвузовской международной биохимической научно-практической конференции «Обмен веществ при адаптации и повреждении» (Ростов-на-Дону, 2006)., на II-ой региональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы инфекционной патологии Юга России (г. Майкоп, 2006), на Всероссийской научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Перспектива - 2006», «Перспектива - 2007», (Приэльбрусье, 2006, 2007), на 6-м Российском съезде аллергологов и иммунологов СНГ (Санкт-Петербург, 2006), на VII Российском съезде инфекционистов (Нижний Новгород, 2006), на V-м Всемирном конгрессе по иммунопатологии (Москва, 2007), на юбилейной Российской научно-практической конференции с международным участием, посвященная 175-летию со дня рождения (Санкт-Петербург, 2007). Диссертационная работа апробирована на научной конференции кафедр инфекционных болезней, дерматовенералогии, микробиологии вирусологии и иммунобиологии и кафедры последипломного образования, с врачами Республиканского центра по профилактике и борьбы со СПИД и инфекционными заболеваниями МЗ КБР (г. Нальчик, 26 июня 2007г.).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 247 страницах машинописного текста и содержит: введение, 7 глав, заключение, выводы и указатель литературы, включающий 276 отечественных и 144 иностранных авторов. Иллюстрации представлены 87 таблицами, 30 рисунками и 10 примерами из клинических наблюдений.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Клинико-лабораторная характеристика больных. За период с гг. под наблюдением находилось 123 больных ВИЧ-инфекцией находившихся на стационарном лечении и диспансерном учете поликлинического отделения Центра по профилактике и борьбы со СПИД и инфекционными заболеваниями Кабардино-Балкарской Республики г. Нальчика и во 2-ой городской инфекционной больнице г. Краснодара, а также госпитализированных в стационаре. Среди пациентов было 82 мужчин и 41 женщин. Средний возраст больных составил 33,5 года. У ВИЧ-инфицированных диагноз выставлен на основании эпидемиологических, клинических данных и был подтвержден обнаружением в крови специфических антител к белкам вируса иммунодефицита человека I типа методами иммуноферментного анализа (Эколаб Вероностика IV) и иммунного блотинга (NEWLAV BLOT I). В группе больных с половым путем заражения было 34 женщины (27,6%) и 26 мужчин (21,1%). Группу пациентов с парентеральным путем заражения составили 52 мужчин (42,2%) и 11 женщин (8,9%). Парентеральный путь заражения регистрировался с частотой 51,2%, при этом значительный удельный вес составили инфицированные парентерально при внутривенном употреблении наркотиков (48,7% от всех пациентов). В данной группе больные продолжали вводить наркотические препараты, поэтому данную группу больных мы рассматривали как влияние ко-фактора наркомании на ВИЧ-инфекцию.

Заболевание диагностировалось на различных стадиях болезни, но у большинства больных (69,9%) ВИЧ-инфекция выявлялась в стадию первичных проявлений (IIБ, IIВ). Согласно клинической классификации (2001) у 49 больных была диагностирована стадия первичных проявлений 2Б (острая ВИЧ-инфекция без вторичных заболеваний), у 37 стадия 2В (острая ВИЧ-инфекция с вторичными заболеваниями) и у 37 пациентов стадия 3 (латентная). За период наблюдения из 123 человек у 73 отмечалось прогрессирование инфекционного процесса, утяжеление общего состояния и переход в стадию вторичных заболеваний. Так, 4А стадия выявлена у 34 больных, 4Б стадия у 20 и 4В у 19 больных. При углубленном изучении стадии вторичных заболеваний установлены следующие СПИД-маркерные заболевания: распространенная герпетическая инфекция 1 и 2 типа у 47 пациентов, кандидоз слизистых полости рта, пищевода– у 10 пациентов, криптоспоридиоз с диарейным синдромом – у 7, генерализованная цитомегаловирусная инфекция у 4, волосатая лейкоплакия языка у 2, саркома Капоши у одного больного, туберкулезный сепсис с поражением легких, лимфоузлов, печени, селезенки - у 4. Кроме того, у 24 пациентов наблюдалась ВИЧ-кахексия с потерей массы тела на 33,0%, пневмония бактериальной этиологии – у 19 больных, частые острые респираторные вирусные инфекции – у 18, повторные бронхиты бактериальной этиологии - у 10, себорейный дерматит - у 8, периферическая полинейропатия – у 11, фурункулез кожи – у 9, стептодермия – у 8 пациентов. У больных ВИЧ-инфекцией выявлены следующие отягощающие заболевания: сифилис (9,7%), хронический алкоголизм (14,6%), наркомания (48,7%), что может, объясняется их социальным образом жизни обследуемых больных.

В соответствии с целями и задачами настоящей работы больные обследовались в динамике заболевания и делились на периоды: I- период включал 86 больных в нее вошли больные в стадию первичных проявлений (IIБ, IIВ); II-й период составили 77 больных у которых диагностирована латентная стадия; III-й период составили 73 человек, у которых развилась стадия вторичных заболеваний; IV-й и V-й периоды через 1 и 6 месяцев от начала базис-терапии.

Больные ВИЧ-инфекцией получали базис-терапию, которая включала антиретровирусную, антибактериальную, дезинтоксикационную терапию, витоминотерапию и симптоматическую. В качестве антиретровирусной терапии ВИЧ-инфицированным в стадию вторичных проявлений, применяли отечественный препарат тимозид (Азидотимидин, АЗТ, Россия) по 0,6 г в сутки в течение 3 месяцев; битерапию 20 больным (тимозид+невирапин по 0,2 г 1 раз в день) и тритерапию 4 больным (тимозид+невирапин+видекс по 0,2 г 2 раза в день). Критериями эффективности лечения являлось клиническое улучшение, повышение CD4-лимфоцитов и снижение РНК ВИЧ. Группе больным из 25 человек помимо базис-терапии проведено противовоспалительное и иммуномодулирующее лечение с помощью нового иммуностимулятора «Тамерит» из группы аминофталгидрозидов.

Среди обследованных 123 пациентов у 67 ВИЧ-инфекция протекала при ко-инфекции парентеральных вирусных гепатитов В, С и микст В+С. Диагноз устанавливался на основании эпидемиологического анамнеза, клинических данных (наличие симптомокомплекса хронического гепатита, увеличение и уплотнение печени), результатов биохимических-серорлогических исследований (пигментные, ферментные, белковые тесты) и при выявлении маркеров HCV, HBV методом ИФА. С учетом клинико-биохимической характеристики, серологического профиля у 29 больных зарегистрирована латентная фаза хронических гепатитов, а у 38 – фаза репликации. Начало наблюдения в I группе больных с парентеральными вирусными гепатитами совпало с выявлением ВИЧ-инфекции.

Среди 123 пациентов у 36 ВИЧ-инфекция протекала при ко-инфекции ВИЧ и туберкулеза. Было выделено 2 группы больных: I-у группу больных составили 17 человек, у которых заболевание туберкулеза было выявлено до ВИЧ-инфицирования; II-ую группу -19 человек, составили больные, где ВИЧ-инфекция предшествовала туберкулезу. Диагноз туберкулеза основывался на клинико-рентгенологических данных, бактериологически подтвержден у 26 больных. Туберкулез выявлялся часто с поражением органов дыхания: инфильтративный туберкулез был выявлен у 4 человек (11,1%); очаговый туберкулез — у 6 человек (16,7%); фибринозно-кавернозный - у 3 (8,3%); кавернозный — у 2 (5,5%); туберкулома — у 1 (2,8%); диссеминированный туберкулез — у 3 (8,3%); генерализованный туберкулез — у 1 больного (2,8%). У 17 больных (15 мужчин и 2 женщин в возрасте от 19 до 49 лет) развился туберкулез легких с осложнениями, такими, как экссудативный плеврит (15) или абсцесс (2). Для проведения клинико-лабораторных исследований под наблюдение была взята I-я группа больных, у которых туберкулез был выявлен до ВИЧ-инфекции и расценивался как сопутствующая инфекция.

Методы исследования. Для решения поставленных в работе задач нами использовались следующие методы исследования:

1.  Активность миелопероксидазы определяли, используя метод Sato (1928),

2.  Активность кислой фосфатазы – реакция азосочетания по Goldberg и Barka (1962) в модификации (1970),

3.  Активность щелочной фосфатазы определяли с использованием варианта метода азосочетания, предложенного (1965),

4.  Содержания катионного белка проводилось по методу (1974) в прописи (1983),

5.  Содержание гликогена определяли по (1947) с применением реактива Шиффа,

6.  Содержание липидов определяли суданом III по методу Гольдмана по прописи и (1957),

7.  Для изучения активности нейтрофильных лейкоцитов был использован тест спонтанного восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) по методике Stuart с соавторами (1975) в модификации (1983),

8.  Содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови скриниговым методом по с соавт. (1991) в модификации (1998).

9.  Уровень малонового диальдегида оценивали по Ushiyma M. at al (1983) в реакции с тиобарбитуровой кислой,

10.  Содержание непрямого антиоксиданта церулоплазмина оценивали по методу Раввина (2000),

11.  Определение уровня внутриклеточного антиоксиданта каталазы эритроцитов проводили по рекомендации (1999),

12.  Определение активности супероксиддисмутазы оценивали по (1974),

13.  Общую антиокислительную активность плазмы крови определяли по (1984).

Количественное определение активности ферментов, цитохимических компонентов и показателей НСТ-теста в лейкоцитах крови осуществляли по методу Kaplow (1955) и выражали показатели в условных единицах.

С целью объективизации оценки полученных результатов, а также для определения степени достоверности диссертационной работы весь материал подвергался математической обработке. Она проводилась на компьютере с использованием статистических функций редактора электронных таблиц Excel из пакета Microsoft Office. При этом придерживались основных законов и положений описательной статистики. Степень достоверности определяли согласно критериев Стьюдента, которые позволяют работать с относительно небольшой выборкой клинического материала (, 1964; , 1965; , 1975; , 1990).

Показатели функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов, молекул средней массы и системы про-антиоксидантной защиты крови у здоровых людей

Для оценки изменений в ферментативной активности лейкоцитов, в содержании катионного белка, гликогена, липидов и средних молекул плазмы крови, а также показателей спонтанного НСТ-теста и про-антиоксидантных систем крови при патологических состояниях необходима стандартизация физиологических компонентов у здоровых людей. Она сводится к нахождению с помощью использованных методик пределов колебаний указанных показателей, то есть, к установлению «собственной нормы», как это принято в цитохимии (, , 1980; , 1986).

Таблица 1

Показатели функционально-метаболической активности нейтрофилов, среднемолекулярных пептидов и свободнорадикальных систем крови

у здоровых людей

Исследование функционально-метаболической активности лейкоцитов, содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови и активность свободнорадикальных систем крови проведено у 62 практически здоровых людей в возрасте от 18 до 64 лет, из числа доноров проходивших медицинский осмотр в Республиканской станции переливания крови. Обследованные лица предварительно прошли клинико-лабораторное обследование. Большой объем используемых исследований, апробированность, специфичность, воспроизводимость используемых методик позволили считать полученные результаты как критерий нормы при проведении клинико-лабораторных исследований и сопоставлений.

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах: 1 2 3 4 5 6 7 8 9